как узнать группу крови и резус фактор в поликлинике
Группа крови и резус-фактор
Комплексное исследование, позволяющее оценить принадлежность крови пациента к одной из групп по системе ABO и определить наличие/отсутствие Rh-антигена.
Группа крови по системе ABO, Rh-фактор.
Синонимы английские
Blood typing, ABO group, Rh type.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Каждый человек обладает уникальным сочетанием антигенов на поверхности своих клеток, в том числе и эритроцитов. На сегодняшний день известно более 250 антигенов эритроцитов, образующих около 30 антигенных систем. В клиническом плане наиболее важными из них являются система АВО и система резус.
Система АВO – основная система совместимости крови. Она представлена агглютиногенами A и B, являющимися гликопротеинами и расположенными на поверхности эритроцитов, и агглютининами альфа и бета, относящимися к классу иммуноглобулинов IgM и циркулирующих в плазме крови. В зависимости от комбинации этих агглютиногенов и агглютининов, выделяют 4 группы крови по системе АВО.
Первая (I) группа крови (самая распространенная в европейской популяции, 42 % населения) также называется O-группа, при ней на поверхности эритроцитов агглютиногены A или B отсутствуют, в плазме выявляются агглютинины альфа и бета.
Вторая (II) группа крови (37 %) также называется A-группа, на поверхности эритроцитов присутствует агглютиноген A, в плазме выявляется агглютинин бета.
Третья (III) группа крови (13 % населения) также называется B-группа крови, на поверхности эритроцитов присутствует агглютиноген B, в плазме выявляется агглютинин альфа.
Четвертая (IV) группа крови (самая редкая, всего 8 % населения) также называется AB-группа крови, на поверхности эритроцитов присутствуют агглютиногены обоих типов A и B, в плазме агглютинины альфа и бета отсутствуют.
Система резус также состоит из нескольких антигенов, главный из которых называется антиген D, или резус-фактор. Примерно у 85 % людей на поверхности эритроцитов можно выявить резус-фактор (резус-положительная кровь).
Принадлежность крови человека к определенной группе по системе АВО и системе резус является генетически обусловленной и не меняется в течение всей жизни.
Определение группы и резус-фактора крови имеет наибольшее значение при подготовке к переливанию крови. Такая необходимость может возникнуть при тяжелой кровопотере, тяжелых формах гемолитических анемий, заболеваниях костного мозга с нарушением нормальной продукции эритроцитов, а также при проведении объемных хирургических операций. Группу крови по системе ABO и системе резус учитывают не только при переливании эритроцитарной массы, но также и при переливании других компонентов крови (тромбоцитарная масса, лейкоцитарная взвесь и др.). Определение группы крови является обязательным тестом при беременности. В этом случае данные о группе крови пациентки и в некоторых случаях о группе крови отца ребенка учитываются для своевременной диагностики и лечения иммунологического конфликта (обусловленного несовместимостью крови плода и матери) и возникающего при этом гемолиза эритроцитов плода. Обязательному обследованию на группу крови и резус-фактор также подлежат военнослужащие, бойцы МЧС и других силовых структур.
Следует отметить, что в клинической практике используют несколько приемов для подтверждения совместимости крови донора и реципиента, в том числе раздельное лабораторное определение группы крови донора и реципиента, проба на индивидуальную совместимость эритроцитов донора и сыворотки реципиента, биологическая проба. Эти мероприятия выполняются потому, что вероятность ошибки при лабораторном определении группы крови небольшая, но все же существует.
Так как в основе лабораторного метода определения групп крови лежит реакция агглютинации, то наличие в сыворотке больного специфических белков (М-протеина, холодовых антител) или некоторых бактерий, препятствующих этой реакции, может приводить к получению ложноположительных или ложноотрицательных результатов. Также прием некоторых лекарственных препаратов может отражаться на результатах определения резус-фактора. Поэтому особое внимание следует уделить подготовке к тесту.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Результаты определения группы крови по системе АВО
Агглютиногены на поверхности эритроцитов
Агглютинины в сыворотке крови
Группа крови, обозначение римскими цифрами
Группа крови, обозначение латинскими буквами
Группа крови + Резус-фактор
Добавить в корзину
Группа крови — это наследуемый признак, остающийся неизменным на протяжении всей жизни. Он определяется по присутствию определенных антигенов (А, В и АВ) на поверхности эритроцитов или по их отсутствию (0). Основная система идентификации по системе АВ0 предполагает четыре группы крови:
Резус-фактор (Rh) — это антиген D. Люди, у которых он есть, являются резус-положительными (Rh+), а остальные — резус-отрицательными (Rh-).
Также учеными установлено наличие, так называемого, ослабленного положительного резус-фактора. Таким людям переливают кровь с отрицательным Rh, но если они выступают в качестве доноров, то их рассматривают, как резус-положительных.
Когда делают анализ на группу крови?
Подобное лабораторное исследование проводится для определения индивидуальных антигенных особенностей красных кровяных телец — эритроцитов. Точная информация о группе крови и резус-факторе пациента крайне важны для врачей в критических ситуациях, когда необходимо срочное переливание крови.
Основными показаниями для определения группы крови и резус-фактора являются:
Особенно актуальным этот анализ является для будущих мам. Если у беременной женщины и ее малыша будет диагностирован резус-конфликт, то на протяжении всего срока беременности ей нужно будет находиться под пристальным наблюдением врачей. Они будут периодически отслеживать наличие и количество антител к эритроцитам в сыворотке крови женщины.
Совместимость групп крови
Совместимость групп крови очень важна. При встрече одинаковых агглютининов и агглютиногенов происходит склеивание эритроцитов, что приводит к смерти. Установлено, что только обладатели первой группы крови являются универсальными донорами, а четвертой — универсальными реципиентами. Чаще всего в медицинской практике используется правило точной совместимости. Вторая группа сочетается со второй, третья с третьей и так далее.
Также недопустимо переливание от донора крови, резус-фактор, который не соответствует Rh реципиента. Если ситуация экстренная и анализ проводить некогда, то хирурги используют кровь с отрицательным резусом. При этом ее объем не превышает 500 мл.
Исследование крови на резус-фактор: анализы и беременность
Беременным женщинам и парам, планирующим завести детей, стоит уделить особое внимание анализу крови на резус-фактор и группу крови. Данная процедура является обязательной при постановке будущей мамы на учет. Если в ходе исследования будет выяснено, что она Rh-, то необходимо будет выяснить резус отца. Если он окажется положительным, то в течение всего срока вынашивания ребенка будет вестись постоянный контроль. Врачи будут следить за наличием и количеством в крови женщины антител к эритроцитам. Если у женщины Rh-, а у плода Rh+, то возникает резус-конфликт. В случае совпадения группы крови и резус-фактора у отца и матери им совершенно не о чем волноваться.
ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К АНАЛИЗАМ КРОВИ
Кровь берется из вены. Необходимо соблюдать общие рекомендации:
Определение группы крови
Определение группы крови – процедура, в ходе которой анализируют антигены – белки, входящие в состав эритроцитов, красных кровяных телец. Существует несколько разновидностей антигенов и вырабатываемых ими антител, исходя из чего каждого человека, в зависимости от состава его эритроцитов, можно причислить к определенной группе крови.
Вы можете пройти определение группы крови и резус-фактора в Поликлинике Отрадное. Срок готовности результатов анализа – от одного дня. Если у вас нет времени, чтобы приехать в клинику, сдать кровь для исследования вы можете и на дому: к вам выедет медсестра.
Наличие данных о собственной группе крови в критической ситуации, когда счет идет на минуты, может спасти человеку жизнь. Если такой информации нет, то врачам, перед переливанием крови придется дополнительно тратить время на исследование. Поэтому каждому пациенту рекомендуется сдать анализ на определение группы крови и всегда носить распечатку результатов исследования с собой: например, в кошельке, рядом с другими важными документами.
Определение группы крови и резус-фактора
Сейчас существует более 30 разных подходов к определению групп крови. В зависимости от используемой системы, количество групп крови может быть разным: системы Келл, Кид и Даффи выделяют 3, а MNSs – 9. И все же наиболее распространенными являются две системы:
Система AB0 выделяет 4 группы крови и подразумевает исследование 3 видов антигенов – A, B и H. Однако в результатах анализов H принято заменять на 0 (что говорит об отсутствии в эритроцитах антигенов A и B). Буквы дополняют цифрами – I, II, III или IV. Именно поэтому сами пациенты часто говорят о своей группе крови не в буквенном, а цифровом обозначении – первая, вторая, третья или четвертая. В ходе анализа учитывается не только присутствие/отсутствие в эритроцитах антигенов, но также и наличие в плазме крови агглютининов. Это специфические белки, антитела, атакующие «чужеродные» эритроциты. Если пациенту перелить кровь группы с не подходящими ему антигенами, агглютинины уничтожат содержащие их эритроциты.
По системе AB0 выделяют следующие группы крови:
Система Rh (резус-фактор) подразумевает анализ антигена D – специфического белка крови, присутствующего или отсутствующего на поверхности эритроцитов. Резус-фактор будет положительным (обозначается как Rh+) при наличии антигена. При отсутствии этого белка — он отрицателен (Rh-).
Резус-фактор имеет значение лишь в 2 ситуациях:
Определение группы крови обычно подразумевает применение обеих систем: ABO и Rh.
Показания к исследованию
Анализ на определение группы крови осуществляется:
При наличии у малыша положительного Rh для профилактики резус-конфликта во время последующей беременности женщине в первые трое суток после родов вводят антирезусный иммуноглобулин.
Важно! Резус-конфликт редко возникает при первой беременности, обычно – при последующих. Это объясняется тем, что иммунная система женщины сталкивается с «чужеродным» антигеном впервые, и не успевает дать сильный ответ, но «запоминает угрозу». В следующий раз она уже отреагирует гораздо агрессивнее. Однако определение группы крови и резус-фактора необходимо проводить и перед первой беременностью. Введение антирезусного препарата после первых родов позволит избежать осложнений последующих беременностей.
Экстренно определение группы крови требуется перед переливанием крови в следующих случаях:
Подготовка к исследованию
Специфических подготовительных мер не требуется. Однако принимать пищу рекомендуется не позднее чем за 4 часа до забора крови. Также накануне процедуры следует исключить чрезмерные физические нагрузки. Лучше прийти в клинику заблаговременно и до сдачи крови в течение 10-15 минут спокойно посидеть.
Так как на результаты исследования могут оказывать влияние некоторые заболевания, прием ряда лекарств, особенности питания и даже эмоциональное состояние пациента, анализ рекомендуется во избежание получения недостоверных результатов проводить два раза. Следует заранее предоставить врачу список всех принимаемых медикаментов.
Методы определения группы крови
В настоящее время существуют 3 основных метода определения группы крови, соответствующие системе AB0:
Кровь для исследования обычно берется из вены, иногда из пальца.
Стандартный метод
Определение группы крови по стандартным сывороткам – наиболее простой и распространенный метод. Используемые сыворотки соответствуют 4 группам крови и окрашены в разные цвета:
Справка. Изогемагглютинирующие сыворотки изготавливают из крови доноров. Они имеют срок годности и должны храниться при температуре 4-8 °С. Сыворотки выпускаются сериями, номер серии отмечают на ампуле. Для анализа берут по две сыворотки каждой группы из разных серий. Это позволяет исключить ошибку в результатах исследования.
Определение группы крови – алгоритм:
Метод перекрестной реакции
Исследование подразумевает проведение двух анализов: со стандартными сыворотками и со стандартными эритроцитами. Для процедуры с эритроцитами используется сыворотка крови пациента. Ее получают путем центрифугирования биоматериала. Сыворотку подвергают воздействию стандартных эритроцитов.
Справка. Стандартные эритроциты получают из донорской крови групп 0, A и B. Для анализа берется по 2 образца одних и тех же эритроцитов из разных серий.
На тарелку наносят капли сыворотки крови пациента, а рядом с ними – капли стандартных эритроцитов. Тарелку покачивают, чтобы материалы смешались. Затем оценивают результаты:
Параллельно с этим исследованием проводят анализ стандартным методом, а затем сравнивают результаты.
Определение группы крови цоликлонами
Определение группы крови с помощью цоликлонов проводится точно так же, как по стандартному методу. Результаты оцениваются тем же образом. Разница лишь в том, что вместо стандартных сывороток применяют цоликлоны анти-А и анти-B – это синтетические сыворотки, содержащие искусственные агглютинины α и β.
Определение резус-фактора
Резус-фактор может определяться с помощью:
Для исследования с помощью стандартной антирезусной сыворотки могут использовать кровь пациента или эритроциты, полученные из нее. В пробирку капают стандартную антирезусную сыворотку, затем вводят каплю крови пациента или эритроциты. Пробирку вращают в руках, чтобы кровь смешалась с сывороткой. В пробирку также добавляют немного физраствора. Результаты оцениваются по наличию/отсутствию агглютинации:
Анализ с помощью цоликлона анти-D супер проводится на тарелке. На нее наносят реагент, рядом располагают каплю крови. Тарелку покачивают, чтобы материалы соединились. Затем, как и в предыдущем методе, оценивают наличие или отсутствие реакции агглютинации.
Резус-фактор: отрицательный и положительный
Около 85% всех жителей планеты обладают положительным резус-фактором. Наличие или отсутствие антигена D не сказывается на самочувствии и здоровье пациента.
Правила расшифровки результатов
Результаты анализа выдаются пациенту в следующей форме:
Результаты анализа на определение группы крови будут актуальными на протяжении всей жизни. Если исследование уже было проведено, повторять его заново не требуется. Группа крови – «постоянная величина» и генетически наследуемый признак, то есть не изменяется в течение жизни. Хотя однажды у юной австралийки Деми Ли-Бреннан поменялась группа крови после пересадки печени. Но данный случай является исключением, и доктора так и не смогли однозначно объяснить этот феномен.
Иногда некоторые пациенты утверждают, что вследствие какого-то заболевания или во время беременности у них изменилась группа крови. Это можно объяснить врачебной ошибкой. И беременность, и некоторые патологии способны затруднять расшифровку результатов анализов, вследствие чего они могут получиться недостоверными. Бывают случаи, что ошибка была допущена при предыдущем исследовании крови.
Как узнать группу крови по полису?
Содержание:
В интернете ходит много легенд по поводу возможности узнать группу крови по полису ОМС. К сожалению, страховые компании еще не достигли такого уровня заботы о гражданах. Туда можно пожаловаться, если вам неправильно определили группу крови. Или заставили сделать это платно, а ваш полис дает право сделать такой анализ за счет бюджета.
Механизмы работы «юной» страховой медицины в РФ еще не налажены, так как она стала обязательной только с 2011 года. Это дает почву для многочисленных махинаций и злоупотреблений. Если возникли проблемы со страховой компанией, то ваши права всегда готовы отстоять юристы по медицинскому страхованию.
Нет времени читать статью?
Поможет ли полис ОМС узнать группу крови?
На самих пластиковых или бумажных полисах всех действующих образцов не предусмотрено наличие какой-либо медицинской информации, в том числе и группы крови. Но по любому из этих полисов вас должны обслужить в любом государственном медучреждении на всей территории РФ, если там оказывают нужные вам услуги, предусмотренные страховкой.
В полисе нигде не пишут группу крови, там есть только ФИО, дата рождения застрахованного гражданина и его пол. Также в документе указаны его уникальные данные в виде штрих-кода и номера. Из текста на карточке можно узнать название и телефон компании ОМС, которая ее выдала, а также срок действия страховки.
Место и форма для указания группы крови предусмотрена в другом документе — в паспорте. Штамп на страницах 18 или 19 могут поставить на станции переливания крови или в поликлинике. Там должна быть указана группа 0, А, B или АB, а также Rh+ или Rh-, а ниже название медучреждения.
Кому важно знать группу крови
В начале беременности акушер-гинеколог должен дать будущей маме направление на ряд анализов крови. Среди них обязательно должны быть и те, которые помогут определить или подтвердить группу по системе АВ0, а также резус-фактор. Своевременно узнать результаты последнего анализа особенно важно, потому что резус-отрицательная кровь может привести к проблемам во время беременности, если вовремя не принять меры.
За сделанные платно анализы крови и другие обследования можно вернуть деньги через страховую компанию. Но для этого нужно:
Знать группу необходимо людям, чья профессия связана с риском травм и кровопотери. Это военные, сотрудники полиции и МЧС, пожарные. При профобследовании этих специалистов обязательно исследуют кровь на резус-принадлежность и по системе АВ0. Это делается для того, чтобы в случае ранения можно было очень быстро подготовить кровь для переливания.
Донорам перед взятием крови также проводят этот анализ. Если уж вы решились на это благородное дело, заодно попросите на станции переливания, чтобы вам поставили в паспорте штамп с указанием группы. Тому, кто отдает другим свою кровь, тоже может когда-нибудь понадобиться срочная гемотрансфузия. И тогда точное знание этой информации ускорит оказание медицинской помощи.
Как с помощью полиса ОМС узнать группу крови
С помощью полиса ОМС вы в некоторых ситуациях сможете узнать группу крови бесплатно. Обычно этот анализ не включают в страховой договор, так как амбулаторно его достаточно сделать один раз. Группа крови и резус-фактор в течение жизни не меняются.
Перед хирургическими операциями, переливанием крови и в начале беременности медики должны определять группу крови независимо от того, есть ли сведения о ней в паспорте или других документах. Ведь врач несет личную ответственность за переливание крови неподходящей группы. И если эти сведения указаны неверно, то цена ошибки может быть самой высокой.
Каждому ребенку определяют группу по системам АВ0 и резус-фактор в роддоме вскоре после рождения. Ее можно узнать из выписки, которую передают из роддома в детскую поликлинику. Но обычно молодых родителей мало интересует, какая группа крови у малыша, а ведь это можно посмотреть в его медицинской карточке.
Бесплатно такой анализ делается только по определенным показаниям, если есть направление врача. А врач может его выписать, если необходимость определить группу крови входит в медицинский стандарт по данному заболеванию. Стандарты можно узнать на сайте Минздрава. Там же можно узнать код услуги для оплаты по полису — определение основных групп крови А12.05.005, а резус-принадлежности А12.05.006. Например, к заболеваниям, при которых необходим этот анализ, относятся:
При краснухе и инфекционном мононуклеозе узнавать группу крови для эффективного лечения совершенно не обязательно. Поэтому в медстандартах для этих болезней мы таких анализов не найдем. А вот при подготовке к ЭКО и у женщины, и у мужчины группу определяют обязательно, и это должно покрываться страховкой. Врач не имеет права давать направление на бесплатные исследования крови, которые не предусмотрены этими документами и не должны оплачиваться по полису. Но он также не имеет права предлагать платно услуги, указанные в медстандарте.
Определение группы крови
В 1901 году выдающийся ученый Карл Ландштейнер открыл группы крови и заложил основы современной трансфузиологии. Исследователь выявил три группы на основании различных вариантов реакции агглютинации эритроцитов и сывороток крови. Материал для исследования был взят у сотрудников собственной лаборатории. Ученики Ландштейнера Декастелло и Стюрли несколькими годами позже открыли четвертую группу, но посчитали ее сомнительной и исключили из результатов исследований. В 1906 году психиатр из Праги Ян Янский подтвердил существование группы AB (IV). Публикация исследования в местном издании оказалась практически незамеченной. В 1910 году после повторного обнаружения четвертой группы Моссом Ян Янский был вынужден доказывать первенство открытия. Чешский ученый предложил цифровое обозначение групп крови: I, II, III, IV.
В трансфузиологии группами крови называют различные сочетания антигенов эритроцитов. Антигены являются генетическими признаками: наследуются от родителей и остаются неизменными на протяжении жизни. В 1980 году Международное сообщество переливания крови разработало числовую терминологию для антигенов эритроцитов. Выделены 23 системы группы крови, включающие 194 антигена. Нумерация в большинстве случаев соответствует порядку обнаружения. Входящие в каждую из 23 систем антигены кодируются шестизначным номером: первые три цифры являются номером системы, оставшиеся три – указывают на специфичность антигена внутри системы.
№ системы | Наименование | Обозначение | Наименование генов | Хромосомная локализация |
---|---|---|---|---|
001 | AB0 | AB0 | AB0 | 9q34.1—q34.2 |
002 | MNS | MNS | GYPA, GYPB, GYPE | 4q28—q31 |
003 | P | P1 | P1 | 22q11.2—qter |
004 | Rh | RH | RHD, RHCE | 1p36.2—p34 |
005 | Lutheran | LU | LU | 19q12—q13 |
006 | Kell | KEL | KEL | 7q33 |
007 | Lewis | LE | FUT3 | 19p33 |
008 | Duffy | FY | FY | 1q22—q23 |
009 | Kidd | JK | JK | 18q11—q12 |
010 | Diego | DI | AE1 | 17q12—q21 |
011 | Yt | YT | ACHE | 7q22 |
012 | Xg | XG | XG | Xp22.32 |
013 | Scianna | SC | SC | 1p36.2—p22 |
014 | Dombrock | DO | DO | неизвестна |
015 | Colton | CO | AQP1 | 7p14 |
016 | Landsteiner-Wiener | LW | LW | 19p13.2—cen |
017 | Chido/Rogers | CH/RG | C4A, C4B | 6p21.3 |
018 | Hh | H | FUT1 | 19q13 |
019 | Kx | XK | XK | Xp21.1 |
020 | Gerbich | GE | GYPC | 2q14—q21 |
021 | Cromer | CROM | DAF | 1q32 |
022 | Knops | KN | CR1 | 1q32 |
023 | Indian | IN | CD44 | 11p13 |
Система группы крови AB0
Групповая принадлежность по системе AB0
По мере движения с запада на восток Евразии частота обнаружения антигена A падает, а антигена B возрастает. Антиген 0 редко встречается в Азии, но имеет широкое распространение у коренных народов Южной Америки, Полинезии и Австралии. Причина – эпидемии инфекционных заболеваний.
Результат типирования крови записывают в историю болезни или в карту донора. Врач-трансфузиолог указывает дату и ставит подпись.
В отдельных случаях во время типирования наблюдается слабовыраженная агглютинация эритроцитов. Недостаточно выраженная реакция объясняется наличием слабых вариантов антигенов A и B. Наибольшее клиническое значение представляют подгруппы A1 и A2. Впервые слабые варианты были обнаружены в 1911 году учеными Dungern и Hirszeld. Позднее в 1930 году Landsteiner и Levine предложили названия подгруппы – A1 и A2. A2 встречается до 20 % в группе A и до 35 % в группе AB. Сыворотка лиц из образцов крови A2 может содержать анти-A1-антитела: в 2 % случаев в группе A2 и в 30 % в A2B. Антитела анти-A1 представляют опасность ввиду агглютинации эритроцитов группы A.
Методика определения групп крови A2 и A2B
Частота выявления эритроцитов A2 существенно варьируется в зависимости от применяемых реагентов. Приводим сравнение результатов исследования при использовании различных методик типирования групп крови A2 и A2B.
Число проанализированных образцов | Группа крови A (II) | Группа крови AB (IV) | ||
---|---|---|---|---|
Число проанализированных образцов | Группа A2 (II) в % | Число проанализированных образцов | Группа A2B (IV) в % | |
Анти-A1 (лектин, фитогемагглютинин) | 1592 | 14,7 | 357 | 23,5 |
Цоликлоны: анти-A, анти-AB | 3599 | 2,1* | 357 | 7,03* |
Цоликлон анти-А — слабый | 3587 | 4,5* | 357 | 11,2* |
Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки | 1592 | 17,4 | 344 | 34,2 |
Примечание: * — агглютинация выражена слабо, присутствуют мелкие агглютинаты на розовом фоне.
Наибольшую точность исследования обеспечивает Анти-A1 (лектин, фитогемагглютинин). Тест рекомендован для выявления подгрупп антигена A у детей младше двух лет. Причина – физиологическая незрелость эритроцитов новорожденных, влекущая ошибочные результаты исследования со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками.
В 1930 году Landsteiner и Levine обнаружили подтип Aint: промежуточный вариант между A1 и A2. Данный антиген характерен для негроидов и достигает 8,5 % у лиц с группой крови A. У европеоидов Aint наблюдался лишь у 1 % людей со второй группой крови. В крайне редких случаях у человека отсутствуют все антигены системы AB0. Фенотип «Бомбей» обусловлен генотипом hh. При отсутствии антигена H у лиц данной категории обнаруживаются анти-A и анти-B антитела.
Методика определения групп крови
Алгоритм выявления группы крови гемагглютинирующими сыворотоками
Для определения группы крови AB0 прямым методом используют две серии стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Подготовьте две серии сывороток трех групп с титром 1:32 или выше. Для забора каждой сыворотки используйте отдельную маркированную пипетку. Подготовьте сыворотку AB(IV) для контроля.
В последнем случае следует удостовериться в отсутствии неспецифической реакции: нанесите на планшет 2 – 3 капли соответствующей группе AB(IV) сыворотки и добавьте одну каплю анализируемых эритроцитов. Перемешайте жидкости и оцените результат спустя пять минут. Отсутствие агглютинации свидетельствует о принадлежности к группе AB(IV), наличие – признак неспецифической реакции. В этом случае, а также при слабовыраженной агглютинации повторите исследование с другими сериями сывороток.
Техника определения группы крови цоликлонами
Моноклональные антитела к антигенам эритроцитов пришли на смену изогемагглютинирующих сывороток. Для каждого типирования достаточно одной серии реагентов анти-A, анти-B, анти-AB. Внедрение моноклональных реагентов позволило значительно упростить и стандартизировать методику типирования по системе AB0. Приводим краткое пошаговое руководство проведения исследования на планшете.
Обычно реакция обнаруживается уже в первые секунды после смешивания. При этом слабые варианты антигенов A и B могут давать более позднюю агглютинацию.
Непрямой метод типирования: алгоритм действий
Методика определения основана на взаимодействии эритроцитов от предварительно типированных лиц групп 0, A, B или смеси эритроцитов от нескольких одногруппных доноров с изогемагглютининами α и β в исследуемой сыворотке.
При работе с каждым типирующим реагентом используйте сухие чистые пипетки. Промывание палочек для перемешивания и пипеток осуществляйте в 0,9 % растворе NaCl.
Заключение о групповой принадлежности
Результаты анализа плазмы со стандартными эритроцитами | Групповая принадлежность | ||
---|---|---|---|
0(I) | A(II) | B(III) | |
— | + | + | 0(I) |
— | — | + | A(II) |
— | + | — | B(III) |
— | — | — | AB(IV) |
Система Резус
Levine и Stetson обнаружили антигены системы Резус в 1939 году. Ученые изучали причины развития гемолитических реакций у рожениц при трансфузиях женщинам идентичных по системам AB0, MN и P. эритроцитов мужей. Годом позже Landsteiner и Wiener продуцировали выработку антител посредством иммунизации кроликов эритроцитами обезьян макака-резус. Антитела получили название анти-RH антитела. Полученные агглютинины вступали в реакцию агглютинации с эритроцитами макак-резус и с эритроцитами 85 % граждан Нью-Йорка белой расы. Вызвавший образование антител антиген получил название RH-фактор (D-фактор).
В редких случаях эритроциты людей не содержат ни одного антигена резус. Фенотип обозначают Rhnull. Ген Xro в этом случае представлен в гомозиготной форме и подавляет продуцирование всех антигенов. Обладатели фенотипа Rhnull не проявляют агглютиногеной активности, но имеют возможность передавать антигены по наследству.
Среди европейцев частота резус-положительных по антигену D лиц составляет 85 %. На мембране красных кровяных телец обычно расположено около 10 000 – 30 000 молекул D. При этом существуют два особых типа D-положительных лиц: D u (слабый) и D partial (частичный). Иммунная система D u и D partial способна вырабатывать анти-D-антитела.
Слабый антиген встречается у 1,5 % резус-положительных лиц и характеризуется низким числом (100 – 500) молекул D на мембране. Является иммуногенным для резус-отрицательных лиц. При этом переливание D-положительных эритроцитов больным со слабым D может вызвать сенсибилизацию кровяных телец донора. Эритроциты с D u слабо агглютинируются или совсем не вступают в прямую реакцию агглютинации с полными анти-резус антителами. Определение резус-принадлежности производят в непрямом антиглобулиновом тесте. Носителей D u считают резус-положительными донорами и резус-отрицательными реципиентами.
Антитела против антигенов резус являются иммунными. Возникают вследствие изосенсибилизации. Специфичность определяется спровоцировавшими образование антител антигенами. Выделяют полные и неполные антитела.
Полные являются IgM антителами. Отличаются большим молекулярным весом, обнаруживаются реже по сравнению с неполными антителами. Способны агглютинировать резус-положительные эритроциты. Имеют меньшее значение при трансфузиях.
Неполные преимущественно относятся к классу IgG. Закрепляются на поверхности резус-положительных эритроцитов без образования агглютинатов. Склеивание кровяных телец осуществляется при наличии коллоидных растворов и протеолитических ферментов или после обработки антиглобулиновой сывороткой. Обладают меньшим в сравнении с полными антителами молекулярным весом. Способны проходить через плаценту. Во время сенсибилизации сперва продуцируются полные антитела, далее в большей мере вырабатываются неполные (иммуноглобулины IgG) антитела.
Техника выявления резус-фактора с использованием цоликлона Анти-D-Супер
В случае наступления реакции кровь оценивается как резус-положительная (Rh+), при отсутствии реакции – как резус-отрицательная (Rh-). При отрицательной либо слабо выраженной агглютинации необходимо повторно провести исследование с неполными анти-D IgG антителами с целью выявления слабого или частичного антигена D.
Методика определения резус-фактора D u в пробирочном тесте
Параллельно с анализом выполняют постановку трех контрольных проб: реагента цоликлон Анти-D (анти-D IgG) со стандартными резус-положительными и резус-отрицательными эритроцитами, анализируемых эритроцитов с раствором желатина без диагностикума анти-D IgG.
Отсутствие результатов реакции с анти-D IgM и выраженная агглютинация с анти-D IgG свидетельствуют об обнаружении слабых форм антигена D. При слабо выраженной агглютинации следует повторить исследование в непрямой пробе Кумбса.
Определение резус-принадлежности стандартным универсальным реагентом
Стандартный реагент антирезус Rh0D содержит поликлональные неполные анти-D-антитела. Параллельно с анализом образца осуществляется контрольное исследование реагента Rh0D со стандартными резус-положительными (одногруппными или группы 0) и резус-отрицательными (одногруппными) эритроцитами.
Результат считается достоверным только после проверки контрольных образцов: наступлении реакции со стандартными резус-положительными и отсутствии реакции – с резус-отрицательными эритроцитами.
Информацию о пошаговой постановке непрямого теста Кумбса с использованием неполных анти-D-антител читайте в разделе сайта «Реакция Кумбса».